HBI沙門氏菌生化鑒定條(GB)主要用于沙門氏菌的生化鑒定,三糖鐵瓊脂原理分析:培養(yǎng)基適合于腸桿菌科的鑒定。用于觀察細(xì)菌對糖的利用和硫化氫(變黑)的產(chǎn)生。培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖,只能利用葡萄糖的細(xì)菌,葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃,但因量少,生成的少量酸,因接觸空氣而氧化,加之細(xì)菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì),生成堿性產(chǎn)物,故使斜面后來又變紅,底部由于是在厭氧狀態(tài)下,酸類不被氧化,所以仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細(xì)菌,則產(chǎn)生大量的酸,使整個(gè)培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。如培養(yǎng)基接種后產(chǎn)生黑色沉淀,是因?yàn)槟承┘?xì)菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng),生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
HBI沙門氏菌生化鑒定條(GB)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:從包裝盒中取出一條生化鑒定條,打開蓋子,用打孔器開孔。如果染菌或變色,則不能使用,重新拿一條。注:打孔器用75%酒精擦拭后使用。
HBI沙門氏菌生化鑒定條(GB)接種方法:
1.從選擇性瓊脂平板(BS瓊脂和XLD瓊脂或HE瓊脂或沙門氏菌顯色培養(yǎng)基)上至少選取2個(gè)典型菌落或可疑菌落,接種三糖鐵瓊脂、賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板。參照GB4789.4-2010標(biāo)準(zhǔn)的判斷結(jié)果,若為可疑沙門氏菌,則按以下步驟操作。
2.菌懸液制備:取一內(nèi)盛2ml無菌水或無菌生理鹽水試管,用接種針從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取單個(gè)菌落至無菌生理鹽水中仔細(xì)研磨制成均一細(xì)菌懸液,每孔加入100ul菌懸液。其中衛(wèi)矛醇半固體采用穿剌接種,賴氨酸和氨基酸對照需加滅菌石蠟覆蓋液面。
3.接種完后做好標(biāo)記,蓋上蓋子,放入底托中,放置36℃±1℃培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)結(jié)束后,放在記錄卡上觀察。