培養(yǎng)基保存的注意事項

一、商品化脫水干燥培養(yǎng)基的保存
 （1）濕度：干粉培養(yǎng)基具有很強的吸濕性，因此必須在保存的干燥的環(huán)境中，特別是已經(jīng)開瓶的培養(yǎng)基，需要盡可能在濕度低的環(huán)境中密封保存。如保存過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)吸潮結(jié)塊、粘稠變色等現(xiàn)象，則不能使用。
  注：有些培養(yǎng)基因干粉中添加了吐溫80（如MRS培養(yǎng)基）等液體成分，粉末略有粘連或小塊狀，可以輕松壓碎，并非吸潮導(dǎo)致，不影響使用。
 （2）溫度：多數(shù)商品化脫水培養(yǎng)基可常溫保存（一般指10-30℃）或陰涼處保存（一般指不超過20℃），對于含不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基（如某些抗生素、顯色底物等），可在2-8℃冷藏保存。保存溫度過高易導(dǎo)致某些不穩(wěn)定成分變性或降解。
 （3）光照：所有培養(yǎng)基都應(yīng)避免陽光直射，置于暗處保存，含對光敏感成分的培養(yǎng)基應(yīng)采取必要的遮光措施保存。

  小結(jié)：環(huán)境的濕度、溫度和光照是影響培養(yǎng)基保存期限的主要因素，未開封的商品化培養(yǎng)基應(yīng)按照說明置于相應(yīng)的條件下保存，已開封的培養(yǎng)基應(yīng)采取適當(dāng)?shù)拿芊獯胧虮M可能降低保存環(huán)境的溫度與濕度，更有利于培養(yǎng)基的保存。

二、實驗室自制培養(yǎng)基的保存
  在實驗室中，有時配制的培養(yǎng)基用不完，需要存放下次使用，有時候需預(yù)制大量培養(yǎng)基待用，經(jīng)常會遇到半成品培養(yǎng)基的保存問題。決定半成品或成品培養(yǎng)基效期的主要因素是光澤、穩(wěn)定和密封性。
 （1）成分簡單的純營養(yǎng)類培養(yǎng)基（如只含蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽等成分相對穩(wěn)定的培養(yǎng)基，營養(yǎng)肉湯、LB肉湯、緩沖蛋白胨水等）：這些培養(yǎng)基相對穩(wěn)定，通常室溫可保存數(shù)天或數(shù)周，若密封避光冷藏保存，通常可保存數(shù)月。
  注：固體培養(yǎng)基用前可水浴加熱或用微波爐溶化，通常只能溶化一次，反復(fù)的加熱溶化會導(dǎo)致營養(yǎng)降低和瓊脂變軟。
 （2）需添加不穩(wěn)定成分的不完整培養(yǎng)基（如添加卵黃的MYP、添加羊血的血瓊脂、添加抗生素的培養(yǎng)基等）：可將未添加不穩(wěn)定成分的基礎(chǔ)培養(yǎng)基在室溫（通常可保存數(shù)天）或冷藏密封（通常可保存數(shù)周或數(shù)月）保存，臨用前再加入不穩(wěn)定成分制成完整培養(yǎng)基。若已加入不穩(wěn)定成分，應(yīng)在2-8℃冷藏保存，盡快使用。
  注：一些液體培養(yǎng)基可以冷凍保存，融化后不影響使用，但含瓊脂的培養(yǎng)基不可以冷凍，結(jié)冰會破壞瓊脂結(jié)構(gòu)；固體的培養(yǎng)基在使用前需加熱溶化后再加入不穩(wěn)定成分，加入不穩(wěn)定成分后不可再加熱。

 （3）只能加熱滅菌或過濾除菌的培養(yǎng)基（如XLD、亞XI酸鹽胱氨酸增菌液等，含不耐熱成分）：此類培養(yǎng)基相對較不穩(wěn)定，建議現(xiàn)配現(xiàn)用，或2-8℃冷藏保存數(shù)日。

三、商品化即用型培養(yǎng)基
 （1）試管或液體瓶裝培養(yǎng)基、均質(zhì)袋等：商品化的即用型通常采取了有效的滅菌方式和密封保存，未開封前按說明保存即可；若已開封，應(yīng)做好有效措施防止污染，密閉保存，含不穩(wěn)定成分的應(yīng)冷藏保存。
  注：一些含染料或酸堿指示劑的培養(yǎng)基應(yīng)注意避光保存，如煌綠乳糖膽鹽、RV肉湯、乳糖蛋白胨等培養(yǎng)基，長時間見光易發(fā)生變色。
 （2）瓊脂斜面、平皿等：大多數(shù)商品化的瓊脂培養(yǎng)基建議保存在20℃左右的環(huán)境中，含不穩(wěn)定成分的瓊脂培養(yǎng)基可置于5℃左右的冷庫中保存。

   ① 目前市場上大多數(shù)的平皿保存溫度都寫室溫或5-25℃的一個很寬的保存范圍，但在實際保存過程中受水份蒸發(fā)和冷凝水的影響，建議保存在20℃左右效果更佳，溫度過低易出現(xiàn)冷凝水，溫度過高易導(dǎo)致培養(yǎng)基失水。

   ② 不建議使用冰箱保存。冰箱的溫度相對不恒定，制冷過程中溫度偏低易起霜，易導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)冰，長期在冰箱中保存易導(dǎo)致瓊脂出現(xiàn)冰晶，結(jié)構(gòu)被破壞。若要使用冰箱，建議將培養(yǎng)基放置在遠離制冷或貼壁的位置，冷藏溫度盡量調(diào)高一些。

   ③ 拆封后的平皿不易久存，因為在非密閉環(huán)境中平皿易逐漸失水變薄。

 （3）即用型生化管、鑒定條等：一些成分簡單的生化管（如蛋白胨水、嗜鹽性胰胨水等）可在室溫條件下存放較長時間，含酸堿指示劑的需要避光保存，在冷藏條件下可保存更長時間。

 （4）試劑盒、染色液等：建議按照說明書保存，冷藏條件更穩(wěn)定。

  總結(jié)：低溫、避光、密封和生產(chǎn)工藝是決定即用型培養(yǎng)基有效期長短的關(guān)鍵外在因素。對于含不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基，低溫、避光是延長有效期的重要手段；對于含瓊脂的培養(yǎng)基，在冷藏時需注意不可使培養(yǎng)基結(jié)冰。

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