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    MLCB寒天培地培養(yǎng)基的試驗 原理、試驗方法及結(jié)果

    更新時間:2024-05-30   點擊次數(shù):346次

    一、試驗原理:

      本產(chǎn)品用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)。

      酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生長所需的碳源和氮源;氯化鈉用于維持均衡的滲透壓,甘露醇作為可發(fā)酵的糖類被沙門氏菌利用產(chǎn)酸;沙門氏菌產(chǎn)生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應(yīng)生成堿性物質(zhì);在堿性條件下,硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)使得菌落的顏色呈現(xiàn)黑色;煌綠和結(jié)晶紫可抑制大腸桿菌等革蘭氏陽性菌的生長;瓊脂起凝固的作用。


    二、培養(yǎng)基配方(g/L):

    表1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基配方

    成分

    添加量

    酵母浸粉

    5.0

    蛋白胨

    10.0

    牛心浸粉

    2.0

    氯化鈉

    4.0

    甘露醇

    3.0

    L-賴氨酸鹽酸鹽

    5.0

    硫代硫酸鈉

    4.0

    檸檬酸鐵銨

    1.0

    煌綠

    0.0125

    結(jié)晶紫

    0.01

    瓊脂

    15.0

    pH值6.8±0.2 

    25℃


    三、試驗方法:

      1.稱取本品49.0g,加熱煮沸溶解于1000mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴大或縮小產(chǎn)品用量)中,冷至50-55℃時,傾入無菌平皿,備用;

      2.質(zhì)控菌液按國標(biāo)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成;

      3.用接種環(huán)取一環(huán)相應(yīng)菌液劃線接種于無菌培養(yǎng)基上,36±1℃需氧培養(yǎng)18-24h。


    四、試驗結(jié)果判斷:

      1.外觀
      此干燥培養(yǎng)基粉末均勻,呈淡黃色,煮沸滅菌后制備好的培養(yǎng)基為藍(lán)紫色透明固態(tài)。

      2.生物學(xué)實驗

      接種以下質(zhì)控菌株,放入培養(yǎng)箱中,于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24 h,觀察試驗結(jié)果。

    表2 MLCB寒天培地培養(yǎng)基不同菌株質(zhì)量控制結(jié)果

    質(zhì)控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    質(zhì)控情況

    菌落特征

    腸炎沙門氏菌

    CMCC(B) 50746

    /

    +++

    黑色中心菌落

    鼠傷寒沙門氏菌

    ATCC 14028

    /

    +++

    黑色中心菌落

    大腸埃希氏菌

    ATCC 25922

    /

    -

    抑制

    金黃色葡萄球菌

    ATCC 25923

    /

    -

    抑制


    圖1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果



    注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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