大腸桿菌顯色培養(yǎng)基主要用于大腸桿菌的快速分離和鑒定。培養(yǎng)基為選擇性培養(yǎng)基,同時(shí)檢測(cè)水和食品中的大腸桿菌和大腸菌群,它可使受損的大腸菌群快速恢復(fù)。除了常規(guī)營(yíng)養(yǎng)外,培養(yǎng)基還含有月桂基硫酸鈉、L-色氨酸和顯色混合劑。顯色混合劑同時(shí)檢測(cè)β半乳糖苷酶和葡萄糖醛酸酶。L-色氨酸用于吲哚反應(yīng)。大腸菌群為β半乳糖苷酶(+),大腸桿菌為β半乳糖苷酶(+)和葡萄糖醛酸酶(+),大腸桿菌O157為葡萄糖醛酸酶(-)。
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)原理:白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素,氯化鈉可維持均衡的滲透壓,十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌,瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑;顯色底物與大腸桿菌的ß-半乳葡糖苷酶發(fā)生特異反應(yīng),水解底物,釋放顯色基團(tuán),使大腸桿菌菌落顯示綠色。大腸桿菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基質(zhì),與靛基質(zhì)試劑作用,在大腸桿菌菌落周圍形成玫瑰吲哚而呈紅色。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,大腸菌群為無(wú)色菌落,其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌。
需要注意的是:使用過(guò)的大腸桿菌顯色培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃,注意避光保存。干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。